液體菌種發(fā)酵罐的使用操作技術(shù):
800升液體罐,蒸汽滅菌、內(nèi)置濾芯,外加層,螺桿空壓機(jī)+冷干機(jī)提供氣源。
1:新罐、染菌罐、換品種、長期不用的罐都要進(jìn)行空滅(所謂的空滅是指不加培養(yǎng)料滅菌)
加純凈水,水位到上試鏡一半即可,開始鏈接蒸汽進(jìn)行升溫,記住滅菌前水位與滅菌后水位的增加高度,升溫126度壓力保持0.15保持30分鐘,關(guān)閉所有排氣閥與進(jìn)氣閥,當(dāng)壓力自然降到0時(shí),打開排氣閥,進(jìn)行排水,空滅結(jié)束。(建議提前一天進(jìn)行空滅,第二天排水)
2:進(jìn)行給液體罐加純凈水,留出蒸汽上升的高度,培養(yǎng)時(shí)液體的高度在上試鏡上方8---10㎝為宜,空滅時(shí)候已經(jīng)知道水位上升的高度,所以這次加水的位置在試鏡上方8---10㎝處去掉蒸汽上升的高度,就是你正常的水位。鍋爐分氣缸的壓力保持0.3---0.4,這樣做完的培養(yǎng)液的高度是理想的高度。
3:純凈水加到高度后,打開進(jìn)氣閥門攪拌冷水,進(jìn)行秤培養(yǎng)料,把所有培養(yǎng)料秤好后倒入罐內(nèi)(注:別忘記放消泡劑)擰緊倒料口的蓋子,打開排氣閥門,準(zhǔn)備滅菌培養(yǎng)料。
4:打開分氣缸的污水閥門,把管道內(nèi)部的污水排凈,直到冒出蒸汽時(shí)排污閥即可關(guān)閉,檢查蒸汽管道鏈接是否鏈接安全,檢查確認(rèn)后打開分氣缸閥門,管道內(nèi)蒸汽充滿后打開液體罐進(jìn)蒸汽的閥門開始進(jìn)行升溫滅菌。升溫到90----95度時(shí)關(guān)閉進(jìn)氣閥門停止進(jìn)氣攪拌。(注:一直通著空氣是為了攪拌培養(yǎng)料融化均勻,二:蒸汽遇見冷水發(fā)出的噪音會減小。)95度時(shí)噪音減小后關(guān)閉進(jìn)氣閥,100度時(shí)排氣閥關(guān)小微開。?
5:檢查溫度顯示是否與罐體上的壓力吻合(醫(yī)用壓力表外圈帶有溫度)如果不一致可以調(diào)節(jié)排氣閥的大小進(jìn)行吻合。直到壓力到0.15溫度126度。
6:開始進(jìn)行像濾芯內(nèi)通蒸汽,(注:目的是為了叫濾芯內(nèi)部潮濕,延長濾芯壽命與滅菌,二是為了叫濾芯內(nèi)部空氣流動,擠壓停留死角的冷空氣達(dá)到滅菌的效果)
7:開始計(jì)時(shí),保持壓力停留在0.14--0.15,溫度126度,計(jì)時(shí)60分鐘。
8:計(jì)時(shí)結(jié)束后,先關(guān)閉罐體的蒸汽閥,在關(guān)閉鍋爐分氣缸上面的閥門,(注:按順序關(guān)閉閥門)閥門關(guān)閉后待蒸汽管道壓力自然冷卻后,開始鏈接外加層的循環(huán)水,采用低進(jìn)高出的鏈接方式,在外加層下方鏈接進(jìn)水。
9:打開排水閥門后,開始打開冷水閥門進(jìn)行外加層循環(huán)水給罐內(nèi)培養(yǎng)液降溫,看壓力自然降到0.1以下,調(diào)節(jié)油水分離器的調(diào)節(jié)閥,當(dāng)油水分離器壓力表的壓力大于液體灌壓力時(shí),打開通往罐內(nèi)濾芯的閥門,進(jìn)行給液體罐內(nèi)培養(yǎng)液攪拌降溫,溫度降到26---28度時(shí)即可停止外加層進(jìn)水冷卻。
10:將做好檢測無異樣的搖瓶取來,停止液體發(fā)酵罐房間的所有空氣流動,接種口周圍用75%的酒精噴灑消毒,將火焰圈盤在接種口一圈,迅速打開排氣閥,當(dāng)壓力掉到0.01時(shí)打開接種蓋同時(shí)關(guān)閉排氣閥。(接種閥一直又壓力向外流動以免雜菌進(jìn)入)拿起搖瓶輕輕搖動幾圈,在火焰圈上方燒灼瓶口,取下瓶塞,快速將搖瓶種倒入罐內(nèi),燒灼接種蓋擰緊接種蓋,接種結(jié)束(往罐內(nèi)倒入搖瓶時(shí),速度越快動作越輕為佳)
11:接種結(jié)束后調(diào)節(jié)液體罐的進(jìn)氣量,壓力調(diào)節(jié)在0.02---0.04之間既可以,記住接種時(shí)間與日期。這個液體罐制作完畢。
不同液體罐不同操作方法,但是原理相同。