食用菌液體菌種生產(chǎn)方法(發(fā)酵罐法)
傳統(tǒng)菌種生產(chǎn)工藝,一般是由試管母種擴(kuò)繁成二級種、三級種,生產(chǎn)周期長、污染率高、成本高、需大量人工、管理困難。液體菌種生產(chǎn)具有純度高、活力強(qiáng)、繁殖快的特點,接種到培養(yǎng)料內(nèi)有流動性好、萌發(fā)點多,發(fā)菌迅速等特種點。應(yīng)用于生產(chǎn)與固體菌種相比有以下優(yōu)點:
1.菌種生產(chǎn)周期短。固體種一般需25—40天,而液體種僅需3—7天。
2.接種后,萌發(fā)點多萌發(fā)點多、發(fā)菌快、出菇周期短。接種24小時菌絲布滿料面,3—15天長滿菌袋,一般品種10天左右可出菇。
3.接種方便、成本低。用液體菌種接種一般每袋成本是1—3分,每人每小時可接800袋以上,提升效益4—5倍。
4. 適宜工廠化生產(chǎn)??芍苯佑糜谠耘嗔线M(jìn)行出菇,大批量生產(chǎn)菌袋。為食用菌集約化、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)創(chuàng)造了條件。因此,適宜我國國情的液體菌種設(shè)備的出現(xiàn),必將在食用菌生產(chǎn)領(lǐng)域引發(fā)一場新的革命。 液體菌種具有固體(顆粒)菌種無可比擬的優(yōu)勢,但是液體菌種生產(chǎn)設(shè)備是近幾年剛發(fā)展起來并逐漸成熟的,因此很多人對此很陌生。在這里我們對此進(jìn)行簡單介紹
一、液體菌種設(shè)備基本原理
一種食用菌自身的生長必須滿足其對溫度、濕度、需氧量、養(yǎng)分等的需要,同時必須避免雜菌感染。在深層發(fā)酵技術(shù)上稱之為選擇性發(fā)酵技術(shù),如啤酒生產(chǎn)技術(shù)當(dāng)屬此例,而白酒生產(chǎn)則是生物菌發(fā)酵技術(shù)。 液體菌種發(fā)酵設(shè)備(包括四大系統(tǒng),溫控系統(tǒng)由控制器、電熱管等組成;供氣系統(tǒng)由空氣壓縮機(jī)、輸送管道、空氣過濾器等組成;冷卻系統(tǒng)由熱交換器、進(jìn)出水管道組成;攪拌系統(tǒng)由射流器、提升管等組成。
二、液體菌種生產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)
1、溶氧量 液體菌種生產(chǎn)中關(guān)鍵的是培養(yǎng)液中氧的溶解量,因為在菌絲生長過程中,必須不斷的吸收溶解其中的氧氣來維持自身的新陳代謝,氧氣在液體(水)中的溶解量與壓力、溫度有關(guān),同時與培養(yǎng)液的接觸面積、滲透壓有很大的關(guān)系。 因此我們設(shè)計發(fā)酵設(shè)備時有效地解決了這些問題,如安裝射流器使氣泡細(xì)碎度增加等。
2、空氣過濾 技術(shù)的關(guān)鍵就是保證進(jìn)入的空氣無菌度高,因此必須選擇孔徑小、材料過濾膜。一般細(xì)菌直徑在0.5-5um,酵母菌在1-10um,病毒一般在20-400mu,所以選擇過濾膜時應(yīng)綜合考慮以上因素。當(dāng)然如果選的太小,成本將大幅度提高。另外環(huán)境對于空氣影響很大,在空氣壓縮機(jī)房、制種車間必須保持環(huán)境清潔。
3、培養(yǎng)液 培養(yǎng)液是菌絲生長發(fā)育的營養(yǎng)源,要求營養(yǎng)均衡。不同的菌種對營養(yǎng)要求偏重不同。配制原料有糖、麩
皮、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。配置培養(yǎng)液時,先將土豆片、麩皮一起煮熟,將汁液濾出,后加入其它輔料混勻即可。
4、接種 培養(yǎng)器上端有接種口,也是裝料口,將母種并瓶后加入抑菌劑,而后必須在火焰圈的保護(hù)下倒入罐體內(nèi),要求動作快、操作準(zhǔn)確。
5、環(huán)境 如前所述,環(huán)境對菌種生產(chǎn)影響很大,過濾器本身不可能把雜菌地濾掉,減少環(huán)境中的雜菌基數(shù)是非常重要的,液體菌種母種接入到經(jīng)滅菌的培養(yǎng)液中只要能形成對雜菌的生長優(yōu)勢就可以抑制雜菌感染,也就是說,液體菌種培養(yǎng)不是建立在無菌的前提下相反是建立在相對無菌的前提下。就此意義上說,保持環(huán)境清潔,減少空氣中雜菌基數(shù),對于提高菌種培養(yǎng)成功率意義較大。
三、 液體菌種生產(chǎn)流程
工藝流程圖: 空氣壓縮→過濾 ↓ 配料→裝罐→滅菌→冷卻→接種→培養(yǎng)→液體種 ↑ 試管斜面種→ 三角瓶顆粒種 配料時先將土豆去皮切片,與麩皮混合后用不銹鋼鍋煮熟并取汁,在將輔料KH2PO4、MgSO4等溶入,混勻后裝入罐中加熱,至121.3℃并維持40分鐘左右進(jìn)行滅菌,滅菌結(jié)束后用冷水冷卻至培養(yǎng)溫度,而后將并瓶后的三角瓶種接上進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)時根據(jù)不同的菌種,設(shè)定適宜的溫度。 培養(yǎng)期間應(yīng)注意觀察,并做好記錄。包括溫度、壓力、氣流量、排出氣體的氣味等。如遇到停電,排氣閥自動關(guān)閉或人工關(guān)閉來保持罐中處于正壓狀態(tài)。來電后重新啟動,并打開排氣閥繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中,可隨時無菌操作采樣分析,幾天后待菌球密度合適(從視鏡觀察)即可接種。
四 應(yīng)用領(lǐng)域
1.液體菌種的科研、生產(chǎn)、制種和工廠化的大規(guī)模生產(chǎn)單位;
2.用于多種微生物的培養(yǎng);
3.含食用菌活性成分的保健食品生產(chǎn);
4.各種奶制品的活性因子生產(chǎn);
5.生產(chǎn)菌絲體,提取生物活性成分來生產(chǎn)各種食品添加劑;
6.微生物發(fā)酵工程來制取農(nóng)藥、醫(yī)藥、激素等;
7.適用于科研單位、菌業(yè)公司、工業(yè)企業(yè)和從事食用菌栽培人員的菌類生產(chǎn)